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- 1、双染免疫荧光
双染免疫荧光
免疫荧光双染技术通过使用两种带有不同颜色荧光标记的抗体,允许研究人员在单一样本中对两种不同的抗原进行区分和精确定位。 这项技术在医院和实验室中广泛应用,因为它能够提供一种强大的工具,用于生物化学和细胞生物学的研究,特别是在诊断和监测疾病过程中。
主要看你检测的目标是否一致,如果一个是检测凋亡的,一个是检测存活状态的,那么图像形态肯定会有差异。如果检测的都是存活状态下的细胞,那么图像形态自然会非常相似。从图片来看,染色确实是一样的。
使用携带有不同颜色荧光标记物的抗体对同一样本中的两种不同抗原进行区分和定位。免疫荧光双染是一种在很多医院和实验室常用的一种生物化学检查方法,存在的意义是使用携带有不同颜色荧光标记物的抗体对同一样本中的两种不同抗原进行区分和定位。重免疫标记法可以分为直接发和间接法。
用PD10柱(Sephadex G25柱)除去游离荧光素,先用25ml PBS淋洗G25柱 ↓ 收集PBS洗脱第一个荧光素结合蛋白峰,测定F/P 比值。第二个荧光素峰为游离荧光素 计算:87×A495 F/P=———A280-0.35×A495 合适的F/P值为2~4。
多重免疫酶标记染色基于酶催化不同底物产生不同颜色产物的原理,用于同一切片内标识两种或两种以上抗原。这种技术使得在光镜下同时观察和对比多个抗原成为可能,样品的保存时间相对较长,一次曝光即可完成成像,因此相较于双重免疫荧光染色法更为常用。
细胞膜和细胞浆表达,如果实现免疫荧光染色,能不能双染要看具体的目的 如果是 co-localization 证明两种蛋白在同一个细胞中表达是可以双染的 如果想进一步呈现两种蛋白在一个细胞中不同的亚细胞分布定位,这个取决于两个因素,第一是蛋白本身的表达是否有明显的亚细胞定位特征。
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